Citogenetica Molecolare
Le analisi citogenetiche molecolari vengono effettuate con la tecnica FISH (Fluorescence In Situ Hybridisation) che consente di rilevare sequenze di DNA su cromosomi in metafase o su nuclei interfasici di preparati citogenetici, in coltura o non coltivati.
Questa tecnica viene utilizzata sopratutto nell’indagine rapida delle principali aneuploidie fetali.
La velocità e la precisione dell’ibridazione in situ fluorescente, unite alla crescente disponibilità di sonde specifiche, rendono lo studio delle anomalie cromosomiche più semplice, e con una risoluzione di gran lunga superiore rispetto a quanto potrebbe oggi evidenziare una indagine citogenetica basata solamente sul bandeggio cromosomico, rilevandone la presenza anche di porzioni molto contenute di DNA (alcune centinaia di basi).
Il laboratorio Fiorente, grazie agli investimenti fatti nel corso degli anni, offre all’utenza la possibilità di ricorrere alla tecnica FISH per le analisi citogenetiche, una possibilità offerta da poche altre strutture nel resto del paese.
Principali applicazioni diagnostiche della FISH:
- Diagnosi delle sindromi da microdelezione o da microduplicazione
- Caratterizzazione di marker cromosomici
- Caratterizzazione di riarrangiamenti cromosomici, sia bilanciati che sbilanciati
- Studio delle delezioni subtelomeriche
- Ricerca aneuploidie su amniociti non coltivati (test rapido)
- Valutazione della frequenza di anomalie cromosomiche nei gameti
- Analisi dei mosaicismi cromosomici da vari tessuti (mucosa buccale)
Analisi con tecnica FISH delle principali sindromi microdeletive e microduplicative indagabili
Elenco di alcune sonde disponibili:
- FISH per Sindrome di Prader willi /Angelman (15q11-13)
- FISH per Sindrome di Cri-du-chat (5p15.2)
- FISH per Sindrome di Di George/VCF(22q11.2)
- FISH per Sindrome di Kallmann (Xp22.3)
- FISH per Sindrome di Miller Dieker (17p13.3)
- FISH per microdelezione SRY (Yp11.31)
- FISH per microdelezione SHOX (Xp22)
- FISH per Sindrome di Smith-Magenis (17p11.21)
- FISH per Sindrome di Williams (7q11.23)
- FISH per Sindrome di Wolf-Hirschhorn (4p16.3)
- FISH con sonde painting (intero cromosoma).
Utilizzate per la caratterizzazione di traslocazioni, riarraniamenti complessi e marker cromosomici. - FISH con sonde subtelomeriche
Specifiche per le regioni subtelomeriche di ogni singolo cromosoma, utilizzate per la ricerca di riarrangiamenti criptici a carico delle regioni terminali - FISH oncologiche
- FISH sonda HER2/CEP17 per indagare lo stato di amplificazione del gene Her 2 su sezioni di carcinoma mammario infiltrante incluse in paraffina.
